Функциональные ответы тромбоцитов и внутриклеточная сигнализация: молекулярные связи. Часть 1: ответы

. Помимо выполнения своих непосредственных физиологических функций – формирования клеточного агрегата в области повреждения кровеносных сосудов, тромбоциты важны и для других физиологических процессов: ускорение мембрана-зависимых реакций свёртывания крови

[

Kinetics of Factor X activation by the membrane-bound complex of Factor IXa and Factor VIIIa.

Panteleev MA, Saenko EL, Ananyeva NM, Ataullakhanov FI.

Biochemistry Journal. 2004, 381, 779-794

https://doi.org/10.1042/BJ20031748

Article | Google Scholar

Hysteresis-like binding of coagulation factors X/Xa to procoagulant activated platelets and phospholipids results from multistep association and membrane-dependent multimerization.

Podoplelova NA, Sveshnikova AN, Kurasawa JH, Sarafanov AG, Chambost H, Vasil’Ev SA, et al.

BiomemBiochimica et Biophysica Acta (BBA)-Biomembranesbranes. 2016, 1858, 1216-1227

https://doi.org/10.1016/j.bbamem.2016.02.008

Article | Google Scholar

]

, поддержание целостности сосудистых стенок

[

Platelets and vascular integrity.

Deppermann C.

Platelets. 2018, 29, 549-555

https://doi.org/10.1080/09537104.2018.1428739

Article | Google Scholar

Physiological and pathophysiological aspects of blood platelet activation through CLEC-2 receptor.

Martyanov AA, Kaneva VN, Panteleev MA, Sveshnikova AN.

Oncohematology. 2018, 13, 83-90

https://doi.org/10.17650/1818-8346-2018-13-3-83-90

Article | Google Scholar

How platelets safeguard vascular integrity: Platelets and vascular integrity.

Ho-Tin-Noé B, Demers M, Wagner DD.

Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2011, 9, 56-65

https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2011.04317.x

Article | Google Scholar

]

, регуляция иммунных ответов

[

Platelet ITAM signaling is critical for vascular integrity in inflammation.

Boulaftali Y, Hess PR, Getz TM, Cholka A, Stolla M, Mackman N, et al.

Journal of Clinical Investigation. 2013, 123 (2), 908-916

https://doi.org/10.1172/JCI65154

Article | Google Scholar

Editorial: Platelets and Immune Responses During Thromboinflammation.

Schattner M, Jenne CN, Negrotto S, Ho-Tin-Noe B.

Frontiers in Immunology. 2020, 11, 1079

https://doi.org/10.3389/fimmu.2020.01079

Article | Google Scholar

he dual role of platelet-innate immune cell interactions in thrombo-inflammation.

Rayes J, Bourne JH, Brill A, Watson SP.

Research and Practice in Thrombosis and Haemostasis. 2020, 4, 23-35

https://doi.org/10.1002/rth2.12266

Article | Google Scholar

]

, рост и регенерация тканей

[

11,

Heat-treated human platelet pellet lysate modulates microglia activation, favors wound healing and promotes neuronal differentiation in vitro.

Nebie O, Barro L, Wu Y-W, Knutson F, Buée L, Devos D, et al.

Platelets. 2021, 32 (2), 226-237

https://doi.org/10.1080/09537104.2020.1732324

Article | Google Scholar

Platelets and cancer angiogenesis nexus.

Wojtukiewicz MZ, Sierko E, Hempel D, Tucker SC, Honn KV.

Cancer and Metastasis Reviews. 2017, 36, 249-262

https://doi.org/10.1007/s10555-017-9673-1

Article | Google Scholar

]

. Для корректного выполнения каждой из этих функций в нужном месте и в нужное время, в тромбоцитах существует обширная система мембранных рецепторов и путей передачи внутриклеточных сигналов.

Активация тромбоцитов приводит к целому набору различных функциональных ответов

[

Platelets and hemostasis.

Panteleev MA, Sveshnikova AN.

Oncohematology. 2014, 9, 65-73

https://doi.org/10.17650/1818-8346-2014-9-2-65-73

Article | Google Scholar

]

(Рис. 1). Исходя из этого, немалым является и количество положительных и отрицательных стимулов, которые должны обрабатываться внутриклеточными сигнальными сетями, чтобы тромбоцитом было принято адекватное конкретной ситуации решение

[

Mathematical Techniques for Understanding Platelet Regulation and the Development of New Pharmacological Approaches. In: Gibbins JM, Mahaut-Smith M, editors. Platelets and Megakaryocytes 

Dunster JL, Panteleev MA, Gibbins JM, Sveshnikova AN.

Advanced Protocols and Perspectives, New York, NY: Springer. 2018, 4, 255-279

https://doi.org/10.1007/978-1-4939-8585-2_15

Article | Google Scholar

]

. В последние годы было показано существование нескольких ингибиторных сигнальных путей в тромбоците, помимо хорошо известных активационных

[

15,

ITIM receptors: more than just inhibitors of platelet activation.

Coxon CH, Geer MJ, Senis YA.

Blood. 2017, 129, 3407-3418

https://doi.org/10.1182/blood-2016-12-720185

Article | Google Scholar

Uncoupling ITIM receptor G6b-B from tyrosine phosphatases Shp1 and Shp2 disrupts murine platelet homeostasis.

Geer MJ, van Geffen JP, Gopalasingam P, Vögtle T, Smith CW, Heising S, et al.

Blood. 2018, 132, 1413-1425

https://doi.org/10.1182/blood-2017-10-802975

Article | Google Scholar

]

. Таким образом, внутриклеточная сигнализация в тромбоцитах, инициируемая по меньшей мере десятью основными рецепторами, состоящая из нескольких переплетённых белковых каскадов и выражающаяся различными функциональными проявлениями, может показаться весьма запутанной (Рис. 2).

Figure 1. Схема основных функциональных ответов тромбоцитов на активацию (каждый из них может быть остановлен игнибиторным сигналом).

Схема взаимодействия между активационными сигналами (тромбин, АДФ, коллаген, тромбоксан А2, vWF, подопланин и адреналин) и функциональными ответами тромбоцитов (изменение формы, выражающееся формированием филоподий; адгезия и агрегация, изображённая активацией интегринов; секреция гранул и синтез тромбоксана А2).

Figure 2. Схема взаимодействия между активационными сигналами (тромбин, АДФ, коллаген, тромбоксан А2, vWF, подопланин и адреналин) и функциональными ответами тромбоцитов (изменение формы, выражающееся формированием филоподий; адгезия и агрегация, изображённая активацией интегринов; секреция гранул и синтез тромбоксана А2).

Пути внутриклеточной сигнализации в тромбоцитах обыкновенно анализируются не как полноценная сеть, а как более простые отдельные цепочки стимул-ответ. Например, активатор X стимулирует рецептор Y, приводя к наработке вторичного мессенджера Z, который управляет дальнейшими ответами «1», «2», «3». Взаимодействие различных рецепторов, которые могли бы работать кооперативно или же, напротив, инактивировать друг друга, обычно не оценивается. Интересно, что в других областях, таких как иммунология, термины «ко-активатор» или «ко-рецептор» уже стали достаточно распространены

[

17,

IκBβ is an essential co-activator for LPS-induced IL-1β transcription in vivo.

Scheibel M, Klein B, Merkle H, Schulz M, Fritsch R, Greten FR, et al.

ournal of Experimental Medicine . 2010, 207, 2621-2630

https://doi.org/10.1084/jem.20100864

Article | Google Scholar

Costimulation, Coinhibition and Cancer.

Inman BA, Frigola X, Dong H, Kwon ED.

Current Cancer Drug Targets . 2007, 7, 15-30

https://doi.org/10.2174/156800907780006878

Article | Google Scholar

]

. Распространение сигнала по коллатеральным сигнальным путям, формирование разных ответов на разные дозы одного и того же агониста, принципы кодирования и декодирования сигнала редко обсуждаются даже за пределами области тромбоцитов

[

A Directed Protein Interaction Network for Investigating Intracellular Signal Transduction.

Vinayagam A, Stelzl U, Foulle R, Plassmann S, Zenkner M, Timm J, et al.

Science Signaling. 2011, 4, rs8

https://doi.org/10.1126/scisignal.2001699

Article | Google Scholar

]

, и тем более почти никогда для тромбоцитов.

Другой обычно упускаемый тип сигнализации в тромбоцитах — это механочувствительность. Данный факт тем более удивителен, что вся жизнь тромбоцитов проходит в потоках крови разных скоростей. Имеется достаточно сведений в пользу того, что тромбоциты могут «ощущать» как скорость сдвига кровотока, так и его турбулентность

[

20,

Platelet Mechanotransduction.

Hansen CE, Qiu Y, McCarty OJT, Lam WA.

Annual Review of Biomedical Engineering. 2018, 20, 253-275

https://doi.org/10.1146/annurev-bioeng-062117-121215

Article | Google Scholar

21,

An integrin αIIbβ3 intermediate affinity state mediates biomechanical platelet aggregation.

Chen Y, Ju LA, Zhou F, Liao J, Xue L, Su QP, et al.

Nature Materials. 2019, 18, 760-769

https://doi.org/10.1038/s41563-019-0323-6

Article | Google Scholar

22,

Evidence for shear-mediated Ca2+ entry through mechanosensitive cation channels in human platelets and a megakaryocytic cell line.

Ilkan Z, Wright JR, Goodall AH, Gibbins JM, Jones CI, Mahaut-Smith MP.

Journal of Biological Chemistry. 2017, 292, 9204-9217

https://doi.org/10.1074/jbc.M116.766196

Article | Google Scholar

Turbulence Activates Platelet Biogenesis to Enable Clinical Scale Ex Vivo Production.

Ito Y, Nakamura S, Sugimoto N, Shigemori T, Kato Y, Ohno M, et al.

Cell. 2018, 174, 636-648

https://doi.org/10.1016/j.cell.2018.06.011

Article | Google Scholar

]

. Этот вопрос будет обсуждаться в следующей части данной серии обзоров. В этой части мы сосредоточимся на функциональных ответах тромбоцитов, а не на инициирующих их сигналах, выделим основные принципы обработки сигналов тромбоцитов и принятия ими решений. Не вдаваясь в подробности внутриклеточной сигнализации в тромбоцитах, мы стремимся прежде всего показать функциональные проявления этой сигнализации и ситуации, в которых эти проявления важны.

Функциональные ответы и их непосредственные причины

О функциональных ответах тромбоцитов мы будем говорить прежде всего в контексте гемостаза, так как данные виды ответов наиболее подробно изучены. Минимальный набор тромбоцитарных функций, необходимых для реакции на на повреждение, обычно включает в себя активацию интегринов aIIbb3

[

Platelet Integrin αIIbβ3: Mechanisms of Activation and Clustering; Involvement into the Formation of the Thrombus Heterogeneous Structure.

Kaneva VN, Martyanov AA, Morozova DS, Panteleev MA, Sveshnikova AN.

Biochemistry (Moscow), Supplement Series A: Membrane and Cell Biology. 2019, 13, 97-110

https://doi.org/10.1134/S1990747819010033

Article | Google Scholar

]

, секрецию плотных гранул

[

Platelet dense granule secretion plays a critical role in thrombosis and subsequentvascular remodeling in atherosclerotic mice.

King SM, McNamee RA, Houng AK, Patel R, Brands M, Reed GL.

Circulation. 2009, 120, 785-791

https://doi.org/10.1161/CIRCULATIONAHA.108.845461

Article | Google Scholar

]

, секрецию альфа-гранул

[

Selective sorting of alpha-granule proteins.

Jr JEI, Battinelli EM.

Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2009, 7, 173-176

https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2009.03387.x

Article | Google Scholar

]

, синтез тромбоксана А2, изменение формы, контракцию и прокоагулянтную активность

[

Kinetics and mechanics of clot contraction are governed by the molecular and cellular composition of the blood.

Tutwiler V, Litvinov RI, Lozhkin AP, Peshkova AD, Lebedeva T, Ataullakhanov FI, et al.

Blood. 2016, 127, 149-159

https://doi.org/10.1182/blood-2015-05-647560

Article | Google Scholar

]

(Рис. 1). Первичная адгезия тромбоцитов, управляемая гликопротеином Ib, не учитывается, так как она не требует активации тромбоцитов

[

Ristocetin-dependent, but not botrocetin-dependent, binding of von Willebrand factor to the platelet glycoprotein Ib-IX-V complex correlates with shear-dependent interactions.

Dong JF, Berndt MC, Schade A, McIntire LV, Andrews RK, López JA.

Blood. 2001, 97, 162-168

https://doi.org/10.1182/blood.v97.1.162

Article | Google Scholar

]

. Важно отметить, что все вышеоговорённые функциональные ответы, вероятно, не одинаково важны или же, что более верно, не каждый из них был чётко продемонстрирован при гемостазе.

Активация интегринов.

Активация интегринов, считается наиболее важным функциональным ответом тромбоцитов. В случае отсутствия интегринов на поверхности тромбоцитов человека, как, например, при тромбастении Гланцмана, могут наблюдаться тяжёлые кровотечения

[

Inherited platelet diseases with normal platelet count: phenotypes, genotypes and diagnostic strategy.

Nurden P, Stritt S, Favier R, Nurden AT.

Haematologica. 2021, 106, 337-350

https://doi.org/10.3324/haematol.2020.248153

Article | Google Scholar

]

. На поверхности тромбоцитов присутствует, приблизительно, 100000 молекул интегринов aIIbb3, которые могут значительно изменять свою аффинность к фактору фон Виллебранда и фибриногену в процессе активации, напрямую влияя на формирование тромбоцитарных агрегатов

[

Platelet Integrin αIIbβ3: Mechanisms of Activation and Clustering; Involvement into the Formation of the Thrombus Heterogeneous Structure.

Kaneva VN, Martyanov AA, Morozova DS, Panteleev MA, Sveshnikova AN.

Biochemistry (Moscow), Supplement Series A: Membrane and Cell Biology. 2019, 13, 97-110

https://doi.org/10.1134/S1990747819010033

Article | Google Scholar

]

. Считается, что все активаторы тромбоцитов, включая и биомеханическую активацию тромбоцитов фактором фон Виллебранда через рецептор GPIb, до какой-то степени приводят к активации интегринов

[

RAP GTPases and platelet integrin signaling.

Stefanini L, Bergmeier W.

Platelets. 2019, 30, 41-47

https://doi.org/10.1080/09537104.2018.1476681

Article | Google Scholar

]

. Данный функциональный ответ тромбоцитов градуален, и, вероятно, содержит промежуточные фазы активации

[

An integrin αIIbβ3 intermediate affinity state mediates biomechanical platelet aggregation.

Chen Y, Ju LA, Zhou F, Liao J, Xue L, Su QP, et al.

Nature Materials. 2019, 18, 760-769

https://doi.org/10.1038/s41563-019-0323-6

Article | Google Scholar

]

. Непосредственной причиной перехода интегрина между состояниями является образование большого комплекса белков, ассоциированного с цитоскелетом, на цитозольной стороне плазматической мембраны. Решающую структурную роль в этом комплексе играют белки талин-1

[

Talin-1 is the principal platelet Rap1 effector of integrin activation.

Lagarrigue F, Paul DS, Gingras AR, Valadez AJ, Sun H, Lin J, et al.

Blood. 2020, 136, 1180-1190

https://doi.org/10.1182/blood.2020005348

Article | Google Scholar

]

и киндлин-3

[

Kindlin supports platelet integrin αIIbβ3 activation by interacting with paxillin.

Gao J, Huang M, Lai J, Mao K, Sun P, Cao Z, et al.

Journal of Cell Science. 2017, 130, 3764-3775

https://doi.org/10.1242/jcs.205641

Article | Google Scholar

]

, а переключателем передачи сигнала, запускающим формирование данного комплекса, считается малая растворимая цитозольная ГТФаза Rap1-GTP

[

31,

RAP GTPases and platelet integrin signaling.

Stefanini L, Bergmeier W.

Platelets. 2019, 30, 41-47

https://doi.org/10.1080/09537104.2018.1476681

Article | Google Scholar

32,

Talin-1 is the principal platelet Rap1 effector of integrin activation.

Lagarrigue F, Paul DS, Gingras AR, Valadez AJ, Sun H, Lin J, et al.

Blood. 2020, 136, 1180-1190

https://doi.org/10.1182/blood.2020005348

Article | Google Scholar

Rap1-Rac1 circuits potentiate platelet activation.

Stefanini L, Boulaftali Y, Ouellette TD, Holinstat M, Désiré L, Leblond B, et al.

Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2012, 32, 434-441

https://doi.org/10.1161/ATVBAHA.111.239194

Article | Google Scholar

]

. Помимо αIIbβ3, тромбоциты имеют ряд других интегринов, специфичных для коллагена, фибронектина, ламинина и других молекул. Их значимость для гемостаза ясна в меньшей степени, в то время как механизмы активации кажутся похожими

[

31,

RAP GTPases and platelet integrin signaling.

Stefanini L, Bergmeier W.

Platelets. 2019, 30, 41-47

https://doi.org/10.1080/09537104.2018.1476681

Article | Google Scholar

35,

Platelet integrin α6β1 controls lung metastasis through direct binding to cancer cell-derived ADAM9.

Mammadova-Bach E, Zigrino P, Brucker C, Bourdon C, Freund M, De Arcangelis A, et al.

JCI Insight. 2016, 1 (14), e88245

https://doi.org/10.1172/jci.insight.88245

Article | Google Scholar

he basement membrane protein nidogen-1 supports platelet adhesion and activation.

Lakshmanan HHS, Melrose AR, Sepp A-LI, Mitrugno A, Ngo ATP, Khader A, et al.

Platelets. 2020, 32 (3), 424-428

https://doi.org/10.1080/09537104.2020.1745170

Article | Google Scholar

]

Секреция плотных гранул.

Плотные (или дельта-, δ-) гранулы представляют собой специфичные для тромбоцитов органеллы, содержимое которых высвобождается при активационном сигнале

[

25,

Platelet dense granule secretion plays a critical role in thrombosis and subsequentvascular remodeling in atherosclerotic mice.

King SM, McNamee RA, Houng AK, Patel R, Brands M, Reed GL.

Circulation. 2009, 120, 785-791

https://doi.org/10.1161/CIRCULATIONAHA.108.845461

Article | Google Scholar

37,

Platelet Munc13-4 regulates hemostasis, thrombosis and airway inflammation.

Cardenas EI, Breaux K, Da Q, Flores JR, Ramos MA, Tuvim MJ, et al.

Haematologica. 2018, 103, 1235-1244

https://doi.org/10.3324/haematol.2017.185637

Article | Google Scholar

Platelet-specific deletion of SNAP23 ablates granule secretion, substantially inhibiting arterial and venous thrombosis in mice.

Williams CM, Li Y, Brown E, Poole AW.

Blood Advances. 2018, 2, 3627-3636

https://doi.org/10.1182/bloodadvances.2018023291

Article | Google Scholar

]

. Плотные гранулы содержат, в основном, низкомолекулярные соединения, главным из которых является АДФ, способный активировать соседние тромбоциты

[

Assessment of the effects of Syk and BTK inhibitors on GPVI-mediated platelet signaling and function.

Zheng TJ, Lofurno ER, Melrose AR, Lakshmanan HHS, Pang J, Phillips KG, et al.

American Journal of Physiology: Cell Physiology. 2021, NaN, NaN

https://doi.org/10.1152/ajpcell.00296.2020

Article | Google Scholar

]

. Другим компонентом, который в последнее время привлекает большое внимание, является полифосфат, имеющий ряд потенциальных ролей в каскаде свертывания крови

[

40,

A Flow Cytometry-Based Assay for Procoagulant Platelet Polyphosphate.

Labberton L, Long AT, Gendler SJ, Snozek CL, Stavrou EX, Nickel KF, et al.

Cytometry Part B: Clinical Cytometry. 2018, 94, 369-373

https://doi.org/10.1002/cyto.b.21492

Article | Google Scholar

Platelet polyphosphate induces fibroblast chemotaxis and myofibroblast differentiation.

Suess PM, Smith SA, Morrissey JH.

Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2020, 18, 3043-3052

https://doi.org/10.1111/jth.15066

Article | Google Scholar

]

. Функциональная роль других компонентов плотных гранул, таких как АТФ, серотонин и кальций ясна в меньшей степени

[

41,

Platelet polyphosphate induces fibroblast chemotaxis and myofibroblast differentiation.

Suess PM, Smith SA, Morrissey JH.

Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2020, 18, 3043-3052

https://doi.org/10.1111/jth.15066

Article | Google Scholar

Sorting machineries: how platelet-dense granules differ from α-granules.

Chen Y, Yuan Y, Li W.

Bioscience Reports. 2018, 38, NaN

https://doi.org/10.1042/BSR20180458

Article | Google Scholar

]

. В отличие от активации интегринов, высвобождение плотных гранул происходит только при сильной стимуляции. Так, при стимуляции тромбоцитов АДФ (считающимся слабым активатором), секреция плотных гранул происходит достаточно слабо

[

The effect of P2Y12 inhibition on platelet activation assessed with aggregation- and flow cytometry-based assays.

Leunissen TC, Wisman PP, van Holten TC, de Groot PG, Korporaal SJ, Koekman AC, et al.

Platelets. 2017, 28, 567-575

https://doi.org/10.1080/09537104.2016.1246713

Article | Google Scholar

]

. Внутриклеточный механизм дифференциального высвобождения плотных гранул до сих пор остается спорным

[

37,

Platelet Munc13-4 regulates hemostasis, thrombosis and airway inflammation.

Cardenas EI, Breaux K, Da Q, Flores JR, Ramos MA, Tuvim MJ, et al.

Haematologica. 2018, 103, 1235-1244

https://doi.org/10.3324/haematol.2017.185637

Article | Google Scholar

Platelet-specific deletion of SNAP23 ablates granule secretion, substantially inhibiting arterial and venous thrombosis in mice.

Williams CM, Li Y, Brown E, Poole AW.

Blood Advances. 2018, 2, 3627-3636

https://doi.org/10.1182/bloodadvances.2018023291

Article | Google Scholar

]

и будет обсуждаться в следующей части этого обзора. Ключевыми регуляторами передачи сигнала, опосредующим эти процессы, предположительно, являются различные изоформы протеинкиназы C

[

44,

Diverse functions of protein kinase C isoforms in platelet activation and thrombus formation.

Harper MT, Poole AW.

Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2010, 8, 454-462

https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2009.03722.x

Article | Google Scholar

Differential role of protein kinase C delta isoform in agonist-induced dense granule secretion in human platelets.

Murugappan S, Tuluc F, Dorsam RT, Shankar H, Kunapuli SP.

Journal of Biological Chemistry. 2004, 279, 2360-2367

https://doi.org/10.1074/jbc.M306960200

Article | Google Scholar

]

и мембранные фосфатидилинозитолы

[

46,

Regulation of membrane trafficking by signalling on endosomal and lysosomal membranes.

Li X, Garrity AG, Xu H.

Journal of Physiology. 2013, 591, 4389-4401

https://doi.org/10.1113/jphysiol.2013.258301

Article | Google Scholar

An early endosome–derived retrograde trafficking pathway promotes secretory granule maturation.

Ma C-IJ, Yang Y, Kim T, Chen CH, Polevoy G, Vissa M, et al.

Journal of Cell Biology. 2020, 219, e201808017

https://doi.org/10.1083/jcb.201808017

Article | Google Scholar

]

Секреция альфа гранул.

Альфа (α-) гранулы представляют собой другой тип тромбоцитарных внутриклеточных везикул, высвобождаемых при активации тромбоцитов. Интересно, что в отличие от плотных гранул, a-гранулы не являются обязательно сферическими структурами

[

Structural analysis of resting mouse platelets by 3D-EM Reveals an unexpected variation in α-granule shape.

Pokrovskaya I, Tobin M, Desai R, Aronova MA, Kamykowski JA, Zhang G, et al.

Platelets. 2020, NaN, 1-10

https://doi.org/10.1080/09537104.2020.1799970

Article | Google Scholar

]

. a-гранулы несут в себе в основном белки, среди которых фибриноген, фактор фон Виллебранда, фактор V, ингибитор компонента системы комплемента C1, факторы роста и другие молекулы

[

26,

Selective sorting of alpha-granule proteins.

Jr JEI, Battinelli EM.

Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2009, 7, 173-176

https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2009.03387.x

Article | Google Scholar

Platelet Releasate Proteome Profiling Reveals a Core Set of Proteins with Low Variance between Healthy Adults.

Parsons MEM, Szklanna PB, Guerrero JA, Wynne K, Dervin F, O’Connell K, et al.

Proteomics. 2018, 18, e1800219

https://doi.org/10.1002/pmic.201800219

Article | Google Scholar

]

. Мембраны альфа-гранул содержат дополнительные интегрины и Р-селектин. Некоторые исследования предполагают, что компоненты тромбоцитов, активирующие контактный путь свёртывания плазмы крови, содержатся именно в альфа-, а в плотных гранулах

[

Platelet surface-associated activation and secretion-mediated inhibition of coagulation factor XII.

Zakharova NV, Artemenko EO, Podoplelova NA, Sveshnikova AN, Demina IA, Ataullakhanov FI, et al.

PloS One. 2015, 10, e0116665

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0116665

Article | Google Scholar

]

. Имеются данные о том, что существуют подтипы альфа-гранул с разным содержанием, высвобождаемые при разной стимуляции

[

Distinct platelet packaging, release, and surface expression of proangiogenic and antiangiogenic factors on different platelet stimuli.

Chatterjee M, Huang Z, Zhang W, Jiang L, Hultenby K, Zhu L, et al.

Blood. 2011, 117, 3907-3911

https://doi.org/10.1182/blood-2010-12-327007

Article | Google Scholar

]

. Белки в альфа-гранулах участвуют в агрегации тромбоцитов, коагуляции, ангиогенезе, иммунитете, воспалении, поддержании/восстановлении целостности сосудистой стенки и других жизненно важных процессах

[

Platelets and vascular integrity.

Deppermann C.

Platelets. 2018, 29, 549-555

https://doi.org/10.1080/09537104.2018.1428739

Article | Google Scholar

52,

The platelet release reaction: granules’ constituents, secretion and functions.

Rendu F, Brohard-Bohn B.

Platelets. 2001, 12, 261-273

https://doi.org/10.1080/09537100120068170

Article | Google Scholar

The life cycle of platelet granules.

Sharda A, Flaumenhaft R.

F1000Research. 2018, 7, 236

https://doi.org/10.12688/f1000research.13283.1

Article | Google Scholar

]

. Тем не менее, единственным компонентом альфа-гранул, гемостатическая функция которого хорошо установлена, является фактор V, который присутствует в них в значительных количествах и в частично активированной форме. Важность тромбоцитарного фактора V подтверждена как на животных моделях, так и для людей

[

54,

Platelet secretion: From haemostasis to wound healing and beyond.

Golebiewska EM, Poole AW.

Blood Reviews. 2015, 29, 153-162

https://doi.org/10.1016/j.blre.2014.10.003

Article | Google Scholar

Platelets and platelet-derived factor Va confer hemostatic competence in complete factor V deficiency.

Bouchard BA, Chapin J, Brummel-Ziedins KE, Durda P, Key NS, Tracy PB.

Blood. 2015, 125, 3647-3650

https://doi.org/10.1182/blood-2014-07-589580

Article | Google Scholar

]

. Интересно, что белки альфа-гранул остаются связанными с прокоагулянтными тромбоцитами [56], образуя зависимую от полимеризации фибрина и активности трансглутаминазы «шапку»

[

Procoagulant platelets form an α-granule protein-covered “cap” on their surface that promotes their attachment to aggregates.

Abaeva AA, Canault M, Kotova YN, Obydennyy SI, Yakimenko AO, Podoplelova NA, et al.

Journal of Biological Chemistry. 2013, 288, 29621-29632

https://doi.org/10.1074/jbc.M113.474163

Article | Google Scholar

]

. Функция данных структур не до конца ясна, хотя было показано, что «шапка» необходима для прикрепления прокоагулянтных тромбоцитов к агрегатам

[

Identification of different proaggregatory abilities of activated platelet subpopulations.

Yakimenko AO, Verholomova FY, Kotova YN, Ataullakhanov FI, Panteleev MA.

Biophysical Journal. 2012, 102, 2261-2269

https://doi.org/10.1016/j.bpj.2012.04.004

Article | Google Scholar

]

. Считается, что высвобождение альфа-гранул инициируется почти всеми активаторами тромбоцитов

[

59,

A simple, whole blood method for assessment of platelet function: application to dietary intervention.

Allman-Farinelli MA, Bendall L, Troy J, Versluis C, Hall D, Favaloro EJ, et al.

Thrombosis Research. 1998, 90, 163-169

https://doi.org/10.1016/s0049-3848(98)00030-9

Article | Google Scholar

60,

Close relationship between the platelet activation marker CD62 and the granular release of platelet-derived growth factor.

Graff J, Klinkhardt U, Schini-Kerth VB, Harder S, Franz N, Bassus S, et al.

Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2002, 300, 952-957

https://doi.org/10.1124/jpet.300.3.952

Article | Google Scholar

Different G protein-coupled signaling pathways are involved in alpha granule release from human platelets.

Quinton TM, Murugappan S, Kim S, Jin J, Kunapuli SP.

Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2004, 2, 978-984

https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2004.00741.x

Article | Google Scholar

]

Прокоагулянтная активность

Помимо «про-агрегантных» тромбоцитов, есть и другая субпопуляция – прокоагулянтные тромбоциты, на поверхности которых происходит ускорение мембрана-зависимых реакций свёртывания плазмы крови. Более того, исходя из последних данных, можно предположить, что прокоагулянтная активность данной субпопуляции регулируется специальной клеточной структурой в тромбоцитах

[

Coagulation factors bound to procoagulant platelets concentrate in cap structures to promote clotting.

Podoplelova NA, Sveshnikova AN, Kotova YN, Eckly A, Receveur N, Nechipurenko DYu, et al.

Blood. 2016, 128, 1745-1755

https://doi.org/10.1182/blood-2016-02-696898

Article | Google Scholar

]

. Следовательно, формирование прокоагулянтной субпопуляции тромбоцитов – функциональный ответ, механизмы развития которого значимо отличаются от механизмов других ответов, которые более равномерно происходят в популяции тромбоцитов. При формировании субпопуляции прокоагулянтных тромбоцитов происходит инактивация интегринов

[

Dual Mechanism of Integrin αIIbβ3 Closure in Procoagulant Platelets.

Mattheij NJA, Gilio K, van Kruchten R, Jobe SM, Wieschhaus AJ, Chishti AH, et al.

Journal of Biological Chemistry. 2013, 288, 13325-13336

https://doi.org/10.1074/jbc.M112.428359

Article | Google Scholar

]

. Прокоагулянтные тромбоциты образуются при сильной стимуляции тромбином или агонистами гликопротеина VI (например, коллагена) по пути некроза

[

Procoagulant platelets: are they necrotic?

Jackson SP, Schoenwaelder SM.

Blood. 2010, 116, 2011-2018

https://doi.org/10.1182/blood-2010-01-261669

Article | Google Scholar

]

, вызванного перегрузкой митохондрий кальцием

[

65,

Compartmentalized calcium signaling triggers subpopulation formation upon platelet activation through PAR1.

Sveshnikova AN, Ataullakhanov FI, Panteleev MA.

Molecular BioSystems. 2015, 11, 1052-1060

https://doi.org/10.1039/C4MB00667D

Article | Google Scholar

Mechanisms of increased mitochondria-dependent necrosis in Wiskott-Aldrich syndrome platelets.

Obydennyi SI, Artemenko EO, Sveshnikova AN, Ignatova AA, Varlamova TV, Gambaryan S, et al.

Haematologica. 2020, 105, 1095-1106

https://doi.org/10.3324/haematol.2018.214460

Article | Google Scholar

]

. Интересно, что и более слабые активаторы, такие как АДФ, способны тонко регулировать образование прокоагулянтных тромбоцитов

[

Modulation and pre-amplification of PAR1 signaling by ADP acting via the P2Y12 receptor during platelet subpopulation formation.

Shakhidzhanov SS, Shaturny VI, Panteleev MA, Sveshnikova AN.

Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-General Subjects. 2015, 1850, 2518-2529

https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2015.09.013

Article | Google Scholar

]

Другие ответы тромбоцитов

Самый ранний ответ тромбоцитов на любые виды активации, даже очень незначительные, — это изменение формы от эллипсоида к сфере, связанное с реорганизацией периферического кольца микротрубочек

[

68,

Motor-driven marginal band coiling promotes cell shape change during platelet activation.

Diagouraga B, Grichine A, Fertin A, Wang J, Khochbin S, Sadoul K.

Journal of Cell Biology. 2014, 204, 177-185

https://doi.org/10.1083/jcb.201306085

Article | Google Scholar

Tubulin in Platelets: When the Shape Matters.

Cuenca-Zamora EJ, Ferrer-Marín F, Rivera J, Teruel-Montoya R.

International Journal of Molecular Sciences. 2019, 20, NaN

https://doi.org/10.3390/ijms20143484

Article | Google Scholar

]

. Функциональная значимость этого перехода не ясна. После изменения формы на сферическую происходит образование ламеллиподий и филоподий, приводящих к увеличению площади поверхности тромбоцитов и, как следствие, увеличению площади поверхности контакта с тромбоцитов друг с другом в агрегате, а также со стенкой сосудов

[

Platelet actin nodules are podosome-like structures dependent on Wiskott-Aldrich syndrome protein and ARP2/3 complex.

Poulter NS, Pollitt AY, Davies A, Malinova D, Nash GB, Hannon MJ, et al.

Nature Communications. 2015, 6, 7254

https://doi.org/10.1038/ncomms8254

Article | Google Scholar

]

. Эти стадии вызываются перестройкой актинового цитоскелета

[

70,

Platelet actin nodules are podosome-like structures dependent on Wiskott-Aldrich syndrome protein and ARP2/3 complex.

Poulter NS, Pollitt AY, Davies A, Malinova D, Nash GB, Hannon MJ, et al.

Nature Communications. 2015, 6, 7254

https://doi.org/10.1038/ncomms8254

Article | Google Scholar

latelet Shape Changes during Thrombus Formation: Role of Actin-Based Protrusions.

Bender M, Palankar R.

Hamostaseologie. 2021, 41, 14-21

https://doi.org/10.1055/a-1325-0993

Article | Google Scholar

]

, в значительной степени индуцируемой тромбином и поддерживаемой АДФ. В меньшей степени подобное «распластывание» тромбоцитов зависит от активации коллагеном

[

latelet Shape Changes during Thrombus Formation: Role of Actin-Based Protrusions.

Bender M, Palankar R.

Hamostaseologie. 2021, 41, 14-21

https://doi.org/10.1055/a-1325-0993

Article | Google Scholar

]

. Способность тромбоцитов изменять свою форму значительно влияет на упаковку тромбоцитов внутри тромба, что приводит к увеличению плотности тромбов и снижению их пористости

[

Platelet packing density is an independent regulator of the hemostatic response to injury.

Mirramezani M, Herbig BA, Stalker TJ, Nettey L, Cooper M, Weisel JW, et al.

Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2018, 16, 973-983

https://doi.org/10.1111/jth.13986

Article | Google Scholar

]

. Неясно, насколько изменение формы принципиально необходимо с точки зрения формирования плотного тромбоцитарного сгустка, поскольку некорректно регулируемая полимеризация актина у пациентов с синдромом Вискотта-Олдрича приводит к формированию уменьшенных тромбоцитов, но не к их дисфункции

[

66,

Mechanisms of increased mitochondria-dependent necrosis in Wiskott-Aldrich syndrome platelets.

Obydennyi SI, Artemenko EO, Sveshnikova AN, Ignatova AA, Varlamova TV, Gambaryan S, et al.

Haematologica. 2020, 105, 1095-1106

https://doi.org/10.3324/haematol.2018.214460

Article | Google Scholar

WASP plays a novel role in regulating platelet responses dependent on αIIbβ3 integrin outside-in signalling.

Shcherbina A, Cooley J, Lutskiy MI, Benarafa C, Gilbert GE, Remold‐O’Donnell E.

British Journal of Haematology. 2010, 148, 416-427

https://doi.org/10.1111/j.1365-2141.2009.07959.x

Article | Google Scholar

]

Другой ранний и легко индуцируемый ответ - синтез тромбоксана А2, производимый фосфолипазой А2, циклооксигеназой (в основном ЦОГ-1) и тромбоксансинтазой

[

Platelets, diabetes and myocardial ischemia/reperfusion injury.

Russo I, Penna C, Musso T, Popara J, Alloatti G, Cavalot F, et al.

Cardiovascular Diabetology. 2017, 16, NaN

https://doi.org/10.1186/s12933-017-0550-6

Article | Google Scholar

]

. Тромбоксан А2 представляет собой липидный эйкозаноид, действующий на тромбоциты подобно АДФ

[

Thromboxane A2: Mechanisms of Synthesis and Intracellular Signaling System of Realization

Barinov EF.

Kardiologiia. 2016, 56, 83-90

https://doi.org/10.18565/cardio.2016.4.83-90

Article | Google Scholar

]

. До сих пор неясно, может ли тромбоксан А2 активировать тромбоцит, произведший его. На первом этапе синтеза тромбоксана в тромбоцитах арахидоновая кислота отрезается от мембранных фосфолипидов фосфолипазой А2, а на втором этапе происходит непосредственно образование тромбоксана А2 в результате активности ЦОГ и тромбоксансинтазы. Интересно, что при синтезе тромбоксана единственной строго регулируемой стадией является стадия активации фосфолипазы А2. Поэтому продукция тромбоксана А2 покоящимися тромбоцитами может быть индуцирована при добавлении арахидоновой кислоты к суспензии тромбоцитов, что позволяет «обойти» стадию активности фосфолипазы А2

[

Is arachidonic acid stimulation really a test for the response to aspirin? Time to think again?

Olechowski B, Ashby A, Mariathas M, Khanna V, Mahmoudi M, Curzen N.

Expert Review of Cardiovascular Therapy. 2017, 15, 35-46

https://doi.org/10.1080/14779072.2017.1266255

Article | Google Scholar

]

. Тромбоциты имеют две изоформы фосфолипаз A2, C- и I-. Первый активируется при небольшом повышении концентрации кальция в цитозоле, и, вероятно, поэтому все классические активаторы тромбоцитов вызывают синтез тромбоксана. Второй тип фосфолипазы А2 активируется независимо от кальция, и его роль в тромбоцитах еще не ясна

[

Group VIB calcium-independent phospholipase A2 (iPLA2γ) regulates platelet activation, hemostasis and thrombosis in mice.

Yoda E, Rai K, Ogawa M, Takakura Y, Kuwata H, Suzuki H, et al.

PLoS One. 2014, 9, e109409

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0109409

Article | Google Scholar

]

. ЦОГ-1 инактивируется аспирином и является одной из основных мишеней антиагрегационной терапии, назначаемой пациентам с болезнями сердечно-сосудистой системы. Таким образом, можно предположить важность синтеза тромбоксана А2 для формирования артериальных тромбов

[

Regulation of platelet activation and coagulation and its role in vascular injury and arterial thrombosis.

Tomaiuolo M, Brass LF, Stalker TJ.

Interventional Cardiology Clinics. 2017, 6, 1-12

https://doi.org/10.1016/j.iccl.2016.08.001

Article | Google Scholar

]

Контракция тромбоцитов, иногда называемая «ретракцией», происходит на более поздней стадии образования пробки/тромба и происходит в результате классического взаимодействия актин/миозин

[

The critical role of myosin IIA in platelet internal contraction.

Johnson GJ, Leis LA, Krumwiede MD, White JG.

Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2007, 5, 1516-1529

https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2007.02611.x

Article | Google Scholar

]

. Контракция наблюдается при активации тромбоцитов различными агонистами, однако, сигнальные пути, запускающие контракцию, в настоящий момент малоизучены. Показано, что передача сигналов интегринами «снаружи-внутрь» является ключевой для этого процесса

[

Calpain Cleavage of Focal Adhesion Proteins Regulates the Cytoskeletal Attachment of Integrin αIIbβ3 (Platelet Glycoprotein IIb/IIIa) and the Cellular Retraction of Fibrin Clots.

Schoenwaelder SM, Yuan Y, Cooray P, Salem HH, Jackson SP.

Journal of Biological Chemistry. 1997, 272, 1694-1702

https://doi.org/10.1074/jbc.272.3.1694

Article | Google Scholar

]

. Кроме того, кальций-зависимый фермент, киназа легкой цепи миозина II (КЛЦМ) также важна для ретракции

[

Biphasic myosin II light chain activation during clot retraction.

Egot M, Kauskot A, Lasne D, Gaussem P, Bachelot-Loza C.

Thrombosis and Haemostasis. 2013, 110, 1215-1222

https://doi.org/10.1160/TH13-04-0335

Article | Google Scholar

]

. Недавние исследования показали, что контракция может быть необходима при перестройке архитектуры тромба. Например, при вытеснении прокоагулянтных тромбоцитов на периферию тромбов для ускорения полимеризации фибрина в этих областях

[

Clot contraction drives the translocation of procoagulant platelets to thrombus surface.

Nechipurenko DY, Receveur N, Yakimenko AO, Shepelyuk TO, Yakusheva AA, Kerimov RR, et al.

Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2019, 39, 37-47

https://doi.org/10.1161/ATVBAHA.118.311390

Article | Google Scholar

]

, для организации ишемических тромбов

[

Quantitative Morphology of Cerebral Thrombi Related to Intravital Contraction and Clinical Features of Ischemic Stroke.

Khismatullin RR, Nagaswami C, Shakirova AZ, Vrtková A, Procházka V, Gumulec J, et al.

Stroke. 2020, 51, 3640-3650

https://doi.org/10.1161/STROKEAHA.120.031559

Article | Google Scholar

]

или для повышения концентрации тромбоцитов на периферии фибринового сгустка, а также для механического увеличение локальной плотности фибрина

[

Asymmetrical Forces Dictate the Distribution and Morphology of Platelets in Blood Clots.

Kovalenko TA, Giraud M-N, Eckly A, Ribba A-S, Proamer F, Fraboulet S, et al.

Cells. 2021, 10, 584

https://doi.org/10.3390/cells10030584

Article | Google Scholar

]

Заключение

Некоторые из тромбоцитарных ответов имеют решающее значение для образования тромбоцитарной пробки (интегрины, плотные гранулы, тромбоксан А2), в то время как другие необходимы, скорее, для усиления свёртывания плазмы крови (прокоагулянтная активность, альфа-гранулы). Другие ответы, хотя и являются важными, имеют менее четко определенную область применимости, например, контракция и изменение формы.

Эти ответы организованы в пространстве-времени: они возникают на разных стадиях в разных частях тромба (рис. 3). Разные степени активации интегринов необходимы для формирования всего тела тромба: плотно упакованных регионов с сильно активированными тромбоцитами в «ядре» тромба и более «рыхлых» регионов слабо активированных тромбоцитов на периферии тромба. Высвобождение плотных гранул принципиально важно для активации тромбоцитов на небольшом удалении от поврежденной области. Альфа-гранулы и прокоагулянтные тромбоциты необходимы для образования фибрина и затвердевания тромба.

Для всех этих ответов существует иерархия тромбоцитарных ответов по степени их силы: некоторые из ответов тромбоциты индуцируются при всех или практически всех видах стимуляции (высвобождение a-гранул, слабая активация интегринов), в то время как другие требуют сильной активации (плотные гранулы, прокоагулянтная активность). Некоторые из ответов являются постепенными, что означает, что реакция постепенно увеличивается в широком диапазоне условий активации (плотные гранулы), в то время как другие похожи на триггерные, что означает, что они либо полностью реализованы, либо не реализованы вообще (альфа-гранулы).

Взаимодействие сигнальных путей, а также кодирование и декодирование информации, порождающие вышеописанные функциональные ответы, мы рассмотрим в следующей части обзора. В качестве заключительной ремарки стоит упомянуть, что именно использование методов современной системной биологии

[

14,

Mathematical Techniques for Understanding Platelet Regulation and the Development of New Pharmacological Approaches. In: Gibbins JM, Mahaut-Smith M, editors. Platelets and Megakaryocytes 

Dunster JL, Panteleev MA, Gibbins JM, Sveshnikova AN.

Advanced Protocols and Perspectives, New York, NY: Springer. 2018, 4, 255-279

https://doi.org/10.1007/978-1-4939-8585-2_15

Article | Google Scholar

84,

Interspecies differences in protein expression do not impact the spatiotemporal regulation of glycoprotein VI mediated activation.

Dunster JL, Unsworth AJ, Bye AP, Haining EJ, Sowa MA, Di Y, et al.

Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2020, 18, 485-496

https://doi.org/10.1111/jth.14673

Article | Google Scholar

Control of Platelet CLEC-2-Mediated Activation by Receptor Clustering and Tyrosine Kinase Signaling.

Martyanov AA, Balabin FA, Dunster JL, Panteleev MA, Gibbins JM, Sveshnikova AN.

Biophysical Journal. 2020, 118, 2641-2655

https://doi.org/10.1016/j.bpj.2020.04.023

Article | Google Scholar

]

в значительной степени облегчает наше понимание взаимосвязи рецептор-функция тромбоцитов.

Figure 3. Функциональные ответы тромбоцитов при формировании артериального тромба.

Вклад авторов

A.N.S. рисовала картинки, писала текст и редактировала статью; M.G.S. рисовала картинки; M.A.P. курировал проект, писал текст и редактировал статью. Все авторы прочитали и согласились с опубликованной версией рукописи.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Финансирование

Исследование было поддержано Российским Научным Фондом (Грант 21-74-20087).

Библиографические ссылки статьи:

Hemostasis and thrombosis beyond biochemistry: roles of geometry, flow and diffusion.
Panteleev MA, Dashkevich NM, Ataullakhanov FI.
Thrombosis Research. 2015, 136, 699-711
https://doi.org/10.1016/j.thromres.2015.07.025
Article|Google Scholar
Novel mouse hemostasis model for real-time determination of bleeding time and hemostatic plug composition.
Getz TM, Piatt R, Petrich BG, Monroe D, Mackman N, Bergmeier W.
Journal of Thrombosis and Haemostasis . 2015, 13, 417-425
https://doi.org/10.1111/jth.12802
Article|Google Scholar
Kinetics of Factor X activation by the membrane-bound complex of Factor IXa and Factor VIIIa.
Panteleev MA, Saenko EL, Ananyeva NM, Ataullakhanov FI.
Biochemistry Journal. 2004, 381, 779-794
https://doi.org/10.1042/BJ20031748
Article|Google Scholar
Hysteresis-like binding of coagulation factors X/Xa to procoagulant activated platelets and phospholipids results from multistep association and membrane-dependent multimerization.
Podoplelova NA, Sveshnikova AN, Kurasawa JH, Sarafanov AG, Chambost H, Vasil’Ev SA, et al.
BiomemBiochimica et Biophysica Acta (BBA)-Biomembranesbranes. 2016, 1858, 1216-1227
https://doi.org/10.1016/j.bbamem.2016.02.008
Article|Google Scholar
Platelets and vascular integrity.
Deppermann C.
Platelets. 2018, 29, 549-555
https://doi.org/10.1080/09537104.2018.1428739
Article|Google Scholar
Physiological and pathophysiological aspects of blood platelet activation through CLEC-2 receptor.
Martyanov AA, Kaneva VN, Panteleev MA, Sveshnikova AN.
Oncohematology. 2018, 13, 83-90
https://doi.org/10.17650/1818-8346-2018-13-3-83-90
Article|Google Scholar
How platelets safeguard vascular integrity: Platelets and vascular integrity.
Ho-Tin-Noé B, Demers M, Wagner DD.
Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2011, 9, 56-65
https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2011.04317.x
Article|Google Scholar
Platelet ITAM signaling is critical for vascular integrity in inflammation.
Boulaftali Y, Hess PR, Getz TM, Cholka A, Stolla M, Mackman N, et al.
Journal of Clinical Investigation. 2013, 123 (2), 908-916
https://doi.org/10.1172/JCI65154
Article|Google Scholar
Editorial: Platelets and Immune Responses During Thromboinflammation.
Schattner M, Jenne CN, Negrotto S, Ho-Tin-Noe B.
Frontiers in Immunology. 2020, 11, 1079
https://doi.org/10.3389/fimmu.2020.01079
Article|Google Scholar
he dual role of platelet-innate immune cell interactions in thrombo-inflammation.
Rayes J, Bourne JH, Brill A, Watson SP.
Research and Practice in Thrombosis and Haemostasis. 2020, 4, 23-35
https://doi.org/10.1002/rth2.12266
Article|Google Scholar
Heat-treated human platelet pellet lysate modulates microglia activation, favors wound healing and promotes neuronal differentiation in vitro.
Nebie O, Barro L, Wu Y-W, Knutson F, Buée L, Devos D, et al.
Platelets. 2021, 32 (2), 226-237
https://doi.org/10.1080/09537104.2020.1732324
Article|Google Scholar
Platelets and cancer angiogenesis nexus.
Wojtukiewicz MZ, Sierko E, Hempel D, Tucker SC, Honn KV.
Cancer and Metastasis Reviews. 2017, 36, 249-262
https://doi.org/10.1007/s10555-017-9673-1
Article|Google Scholar
Platelets and hemostasis.
Panteleev MA, Sveshnikova AN.
Oncohematology. 2014, 9, 65-73
https://doi.org/10.17650/1818-8346-2014-9-2-65-73
Article|Google Scholar
Mathematical Techniques for Understanding Platelet Regulation and the Development of New Pharmacological Approaches. In: Gibbins JM, Mahaut-Smith M, editors. Platelets and Megakaryocytes 
Dunster JL, Panteleev MA, Gibbins JM, Sveshnikova AN.
Advanced Protocols and Perspectives, New York, NY: Springer. 2018, 4, 255-279
https://doi.org/10.1007/978-1-4939-8585-2_15
Article|Google Scholar
ITIM receptors: more than just inhibitors of platelet activation.
Coxon CH, Geer MJ, Senis YA.
Blood. 2017, 129, 3407-3418
https://doi.org/10.1182/blood-2016-12-720185
Article|Google Scholar
Uncoupling ITIM receptor G6b-B from tyrosine phosphatases Shp1 and Shp2 disrupts murine platelet homeostasis.
Geer MJ, van Geffen JP, Gopalasingam P, Vögtle T, Smith CW, Heising S, et al.
Blood. 2018, 132, 1413-1425
https://doi.org/10.1182/blood-2017-10-802975
Article|Google Scholar
IκBβ is an essential co-activator for LPS-induced IL-1β transcription in vivo.
Scheibel M, Klein B, Merkle H, Schulz M, Fritsch R, Greten FR, et al.
ournal of Experimental Medicine . 2010, 207, 2621-2630
https://doi.org/10.1084/jem.20100864
Article|Google Scholar
Costimulation, Coinhibition and Cancer.
Inman BA, Frigola X, Dong H, Kwon ED.
Current Cancer Drug Targets . 2007, 7, 15-30
https://doi.org/10.2174/156800907780006878
Article|Google Scholar
A Directed Protein Interaction Network for Investigating Intracellular Signal Transduction.
Vinayagam A, Stelzl U, Foulle R, Plassmann S, Zenkner M, Timm J, et al.
Science Signaling. 2011, 4, rs8
https://doi.org/10.1126/scisignal.2001699
Article|Google Scholar
Platelet Mechanotransduction.
Hansen CE, Qiu Y, McCarty OJT, Lam WA.
Annual Review of Biomedical Engineering. 2018, 20, 253-275
https://doi.org/10.1146/annurev-bioeng-062117-121215
Article|Google Scholar
An integrin αIIbβ3 intermediate affinity state mediates biomechanical platelet aggregation.
Chen Y, Ju LA, Zhou F, Liao J, Xue L, Su QP, et al.
Nature Materials. 2019, 18, 760-769
https://doi.org/10.1038/s41563-019-0323-6
Article|Google Scholar
Evidence for shear-mediated Ca2+ entry through mechanosensitive cation channels in human platelets and a megakaryocytic cell line.
Ilkan Z, Wright JR, Goodall AH, Gibbins JM, Jones CI, Mahaut-Smith MP.
Journal of Biological Chemistry. 2017, 292, 9204-9217
https://doi.org/10.1074/jbc.M116.766196
Article|Google Scholar
Turbulence Activates Platelet Biogenesis to Enable Clinical Scale Ex Vivo Production.
Ito Y, Nakamura S, Sugimoto N, Shigemori T, Kato Y, Ohno M, et al.
Cell. 2018, 174, 636-648
https://doi.org/10.1016/j.cell.2018.06.011
Article|Google Scholar
Platelet Integrin αIIbβ3: Mechanisms of Activation and Clustering; Involvement into the Formation of the Thrombus Heterogeneous Structure.
Kaneva VN, Martyanov AA, Morozova DS, Panteleev MA, Sveshnikova AN.
Biochemistry (Moscow), Supplement Series A: Membrane and Cell Biology. 2019, 13, 97-110
https://doi.org/10.1134/S1990747819010033
Article|Google Scholar
Platelet dense granule secretion plays a critical role in thrombosis and subsequentvascular remodeling in atherosclerotic mice.
King SM, McNamee RA, Houng AK, Patel R, Brands M, Reed GL.
Circulation. 2009, 120, 785-791
https://doi.org/10.1161/CIRCULATIONAHA.108.845461
Article|Google Scholar
Selective sorting of alpha-granule proteins.
Jr JEI, Battinelli EM.
Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2009, 7, 173-176
https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2009.03387.x
Article|Google Scholar
Clot contraction drives the translocation of procoagulant platelets to thrombus surface.
Nechipurenko DY, Receveur N, Yakimenko AO, Shepelyuk TO, Yakusheva AA, Kerimov RR, et al.
Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2019, 39, 37-47
https://doi.org/10.1161/ATVBAHA.118.311390
Article|Google Scholar
Kinetics and mechanics of clot contraction are governed by the molecular and cellular composition of the blood.
Tutwiler V, Litvinov RI, Lozhkin AP, Peshkova AD, Lebedeva T, Ataullakhanov FI, et al.
Blood. 2016, 127, 149-159
https://doi.org/10.1182/blood-2015-05-647560
Article|Google Scholar
Ristocetin-dependent, but not botrocetin-dependent, binding of von Willebrand factor to the platelet glycoprotein Ib-IX-V complex correlates with shear-dependent interactions.
Dong JF, Berndt MC, Schade A, McIntire LV, Andrews RK, López JA.
Blood. 2001, 97, 162-168
https://doi.org/10.1182/blood.v97.1.162
Article|Google Scholar
Inherited platelet diseases with normal platelet count: phenotypes, genotypes and diagnostic strategy.
Nurden P, Stritt S, Favier R, Nurden AT.
Haematologica. 2021, 106, 337-350
https://doi.org/10.3324/haematol.2020.248153
Article|Google Scholar
RAP GTPases and platelet integrin signaling.
Stefanini L, Bergmeier W.
Platelets. 2019, 30, 41-47
https://doi.org/10.1080/09537104.2018.1476681
Article|Google Scholar
Talin-1 is the principal platelet Rap1 effector of integrin activation.
Lagarrigue F, Paul DS, Gingras AR, Valadez AJ, Sun H, Lin J, et al.
Blood. 2020, 136, 1180-1190
https://doi.org/10.1182/blood.2020005348
Article|Google Scholar
Kindlin supports platelet integrin αIIbβ3 activation by interacting with paxillin.
Gao J, Huang M, Lai J, Mao K, Sun P, Cao Z, et al.
Journal of Cell Science. 2017, 130, 3764-3775
https://doi.org/10.1242/jcs.205641
Article|Google Scholar
Rap1-Rac1 circuits potentiate platelet activation.
Stefanini L, Boulaftali Y, Ouellette TD, Holinstat M, Désiré L, Leblond B, et al.
Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2012, 32, 434-441
https://doi.org/10.1161/ATVBAHA.111.239194
Article|Google Scholar
Platelet integrin α6β1 controls lung metastasis through direct binding to cancer cell-derived ADAM9.
Mammadova-Bach E, Zigrino P, Brucker C, Bourdon C, Freund M, De Arcangelis A, et al.
JCI Insight. 2016, 1 (14), e88245
https://doi.org/10.1172/jci.insight.88245
Article|Google Scholar
he basement membrane protein nidogen-1 supports platelet adhesion and activation.
Lakshmanan HHS, Melrose AR, Sepp A-LI, Mitrugno A, Ngo ATP, Khader A, et al.
Platelets. 2020, 32 (3), 424-428
https://doi.org/10.1080/09537104.2020.1745170
Article|Google Scholar
Platelet Munc13-4 regulates hemostasis, thrombosis and airway inflammation.
Cardenas EI, Breaux K, Da Q, Flores JR, Ramos MA, Tuvim MJ, et al.
Haematologica. 2018, 103, 1235-1244
https://doi.org/10.3324/haematol.2017.185637
Article|Google Scholar
Platelet-specific deletion of SNAP23 ablates granule secretion, substantially inhibiting arterial and venous thrombosis in mice.
Williams CM, Li Y, Brown E, Poole AW.
Blood Advances. 2018, 2, 3627-3636
https://doi.org/10.1182/bloodadvances.2018023291
Article|Google Scholar
Assessment of the effects of Syk and BTK inhibitors on GPVI-mediated platelet signaling and function.
Zheng TJ, Lofurno ER, Melrose AR, Lakshmanan HHS, Pang J, Phillips KG, et al.
American Journal of Physiology: Cell Physiology. 2021, NaN, NaN
https://doi.org/10.1152/ajpcell.00296.2020
Article|Google Scholar
A Flow Cytometry-Based Assay for Procoagulant Platelet Polyphosphate.
Labberton L, Long AT, Gendler SJ, Snozek CL, Stavrou EX, Nickel KF, et al.
Cytometry Part B: Clinical Cytometry. 2018, 94, 369-373
https://doi.org/10.1002/cyto.b.21492
Article|Google Scholar
Platelet polyphosphate induces fibroblast chemotaxis and myofibroblast differentiation.
Suess PM, Smith SA, Morrissey JH.
Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2020, 18, 3043-3052
https://doi.org/10.1111/jth.15066
Article|Google Scholar
Sorting machineries: how platelet-dense granules differ from α-granules.
Chen Y, Yuan Y, Li W.
Bioscience Reports. 2018, 38, NaN
https://doi.org/10.1042/BSR20180458
Article|Google Scholar
The effect of P2Y12 inhibition on platelet activation assessed with aggregation- and flow cytometry-based assays.
Leunissen TC, Wisman PP, van Holten TC, de Groot PG, Korporaal SJ, Koekman AC, et al.
Platelets. 2017, 28, 567-575
https://doi.org/10.1080/09537104.2016.1246713
Article|Google Scholar
Diverse functions of protein kinase C isoforms in platelet activation and thrombus formation.
Harper MT, Poole AW.
Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2010, 8, 454-462
https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2009.03722.x
Article|Google Scholar
Differential role of protein kinase C delta isoform in agonist-induced dense granule secretion in human platelets.
Murugappan S, Tuluc F, Dorsam RT, Shankar H, Kunapuli SP.
Journal of Biological Chemistry. 2004, 279, 2360-2367
https://doi.org/10.1074/jbc.M306960200
Article|Google Scholar
Regulation of membrane trafficking by signalling on endosomal and lysosomal membranes.
Li X, Garrity AG, Xu H.
Journal of Physiology. 2013, 591, 4389-4401
https://doi.org/10.1113/jphysiol.2013.258301
Article|Google Scholar
An early endosome–derived retrograde trafficking pathway promotes secretory granule maturation.
Ma C-IJ, Yang Y, Kim T, Chen CH, Polevoy G, Vissa M, et al.
Journal of Cell Biology. 2020, 219, e201808017
https://doi.org/10.1083/jcb.201808017
Article|Google Scholar
Structural analysis of resting mouse platelets by 3D-EM Reveals an unexpected variation in α-granule shape.
Pokrovskaya I, Tobin M, Desai R, Aronova MA, Kamykowski JA, Zhang G, et al.
Platelets. 2020, NaN, 1-10
https://doi.org/10.1080/09537104.2020.1799970
Article|Google Scholar
Platelet Releasate Proteome Profiling Reveals a Core Set of Proteins with Low Variance between Healthy Adults.
Parsons MEM, Szklanna PB, Guerrero JA, Wynne K, Dervin F, O’Connell K, et al.
Proteomics. 2018, 18, e1800219
https://doi.org/10.1002/pmic.201800219
Article|Google Scholar
Platelet surface-associated activation and secretion-mediated inhibition of coagulation factor XII.
Zakharova NV, Artemenko EO, Podoplelova NA, Sveshnikova AN, Demina IA, Ataullakhanov FI, et al.
PloS One. 2015, 10, e0116665
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0116665
Article|Google Scholar
Distinct platelet packaging, release, and surface expression of proangiogenic and antiangiogenic factors on different platelet stimuli.
Chatterjee M, Huang Z, Zhang W, Jiang L, Hultenby K, Zhu L, et al.
Blood. 2011, 117, 3907-3911
https://doi.org/10.1182/blood-2010-12-327007
Article|Google Scholar
The platelet release reaction: granules’ constituents, secretion and functions.
Rendu F, Brohard-Bohn B.
Platelets. 2001, 12, 261-273
https://doi.org/10.1080/09537100120068170
Article|Google Scholar
The life cycle of platelet granules.
Sharda A, Flaumenhaft R.
F1000Research. 2018, 7, 236
https://doi.org/10.12688/f1000research.13283.1
Article|Google Scholar
Platelet secretion: From haemostasis to wound healing and beyond.
Golebiewska EM, Poole AW.
Blood Reviews. 2015, 29, 153-162
https://doi.org/10.1016/j.blre.2014.10.003
Article|Google Scholar
Platelets and platelet-derived factor Va confer hemostatic competence in complete factor V deficiency.
Bouchard BA, Chapin J, Brummel-Ziedins KE, Durda P, Key NS, Tracy PB.
Blood. 2015, 125, 3647-3650
https://doi.org/10.1182/blood-2014-07-589580
Article|Google Scholar
Coated-platelets: an emerging component of the procoagulant response.
Dale GL.
Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2005, 3, 2185-2192
https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2005.01274.x
Article|Google Scholar
Procoagulant platelets form an α-granule protein-covered “cap” on their surface that promotes their attachment to aggregates.
Abaeva AA, Canault M, Kotova YN, Obydennyy SI, Yakimenko AO, Podoplelova NA, et al.
Journal of Biological Chemistry. 2013, 288, 29621-29632
https://doi.org/10.1074/jbc.M113.474163
Article|Google Scholar
Identification of different proaggregatory abilities of activated platelet subpopulations.
Yakimenko AO, Verholomova FY, Kotova YN, Ataullakhanov FI, Panteleev MA.
Biophysical Journal. 2012, 102, 2261-2269
https://doi.org/10.1016/j.bpj.2012.04.004
Article|Google Scholar
A simple, whole blood method for assessment of platelet function: application to dietary intervention.
Allman-Farinelli MA, Bendall L, Troy J, Versluis C, Hall D, Favaloro EJ, et al.
Thrombosis Research. 1998, 90, 163-169
https://doi.org/10.1016/s0049-3848(98)00030-9
Article|Google Scholar
Close relationship between the platelet activation marker CD62 and the granular release of platelet-derived growth factor.
Graff J, Klinkhardt U, Schini-Kerth VB, Harder S, Franz N, Bassus S, et al.
Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2002, 300, 952-957
https://doi.org/10.1124/jpet.300.3.952
Article|Google Scholar
Different G protein-coupled signaling pathways are involved in alpha granule release from human platelets.
Quinton TM, Murugappan S, Kim S, Jin J, Kunapuli SP.
Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2004, 2, 978-984
https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2004.00741.x
Article|Google Scholar
Coagulation factors bound to procoagulant platelets concentrate in cap structures to promote clotting.
Podoplelova NA, Sveshnikova AN, Kotova YN, Eckly A, Receveur N, Nechipurenko DYu, et al.
Blood. 2016, 128, 1745-1755
https://doi.org/10.1182/blood-2016-02-696898
Article|Google Scholar
Dual Mechanism of Integrin αIIbβ3 Closure in Procoagulant Platelets.
Mattheij NJA, Gilio K, van Kruchten R, Jobe SM, Wieschhaus AJ, Chishti AH, et al.
Journal of Biological Chemistry. 2013, 288, 13325-13336
https://doi.org/10.1074/jbc.M112.428359
Article|Google Scholar
Procoagulant platelets: are they necrotic?
Jackson SP, Schoenwaelder SM.
Blood. 2010, 116, 2011-2018
https://doi.org/10.1182/blood-2010-01-261669
Article|Google Scholar
Compartmentalized calcium signaling triggers subpopulation formation upon platelet activation through PAR1.
Sveshnikova AN, Ataullakhanov FI, Panteleev MA.
Molecular BioSystems. 2015, 11, 1052-1060
https://doi.org/10.1039/C4MB00667D
Article|Google Scholar
Mechanisms of increased mitochondria-dependent necrosis in Wiskott-Aldrich syndrome platelets.
Obydennyi SI, Artemenko EO, Sveshnikova AN, Ignatova AA, Varlamova TV, Gambaryan S, et al.
Haematologica. 2020, 105, 1095-1106
https://doi.org/10.3324/haematol.2018.214460
Article|Google Scholar
Modulation and pre-amplification of PAR1 signaling by ADP acting via the P2Y12 receptor during platelet subpopulation formation.
Shakhidzhanov SS, Shaturny VI, Panteleev MA, Sveshnikova AN.
Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-General Subjects. 2015, 1850, 2518-2529
https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2015.09.013
Article|Google Scholar
Motor-driven marginal band coiling promotes cell shape change during platelet activation.
Diagouraga B, Grichine A, Fertin A, Wang J, Khochbin S, Sadoul K.
Journal of Cell Biology. 2014, 204, 177-185
https://doi.org/10.1083/jcb.201306085
Article|Google Scholar
Tubulin in Platelets: When the Shape Matters.
Cuenca-Zamora EJ, Ferrer-Marín F, Rivera J, Teruel-Montoya R.
International Journal of Molecular Sciences. 2019, 20, NaN
https://doi.org/10.3390/ijms20143484
Article|Google Scholar
Platelet actin nodules are podosome-like structures dependent on Wiskott-Aldrich syndrome protein and ARP2/3 complex.
Poulter NS, Pollitt AY, Davies A, Malinova D, Nash GB, Hannon MJ, et al.
Nature Communications. 2015, 6, 7254
https://doi.org/10.1038/ncomms8254
Article|Google Scholar
latelet Shape Changes during Thrombus Formation: Role of Actin-Based Protrusions.
Bender M, Palankar R.
Hamostaseologie. 2021, 41, 14-21
https://doi.org/10.1055/a-1325-0993
Article|Google Scholar
Platelet packing density is an independent regulator of the hemostatic response to injury.
Mirramezani M, Herbig BA, Stalker TJ, Nettey L, Cooper M, Weisel JW, et al.
Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2018, 16, 973-983
https://doi.org/10.1111/jth.13986
Article|Google Scholar
WASP plays a novel role in regulating platelet responses dependent on αIIbβ3 integrin outside-in signalling.
Shcherbina A, Cooley J, Lutskiy MI, Benarafa C, Gilbert GE, Remold‐O’Donnell E.
British Journal of Haematology. 2010, 148, 416-427
https://doi.org/10.1111/j.1365-2141.2009.07959.x
Article|Google Scholar
Platelets, diabetes and myocardial ischemia/reperfusion injury.
Russo I, Penna C, Musso T, Popara J, Alloatti G, Cavalot F, et al.
Cardiovascular Diabetology. 2017, 16, NaN
https://doi.org/10.1186/s12933-017-0550-6
Article|Google Scholar
Thromboxane A2: Mechanisms of Synthesis and Intracellular Signaling System of Realization
Barinov EF.
Kardiologiia. 2016, 56, 83-90
https://doi.org/10.18565/cardio.2016.4.83-90
Article|Google Scholar
Is arachidonic acid stimulation really a test for the response to aspirin? Time to think again?
Olechowski B, Ashby A, Mariathas M, Khanna V, Mahmoudi M, Curzen N.
Expert Review of Cardiovascular Therapy. 2017, 15, 35-46
https://doi.org/10.1080/14779072.2017.1266255
Article|Google Scholar
Group VIB calcium-independent phospholipase A2 (iPLA2γ) regulates platelet activation, hemostasis and thrombosis in mice.
Yoda E, Rai K, Ogawa M, Takakura Y, Kuwata H, Suzuki H, et al.
PLoS One. 2014, 9, e109409
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0109409
Article|Google Scholar
Regulation of platelet activation and coagulation and its role in vascular injury and arterial thrombosis.
Tomaiuolo M, Brass LF, Stalker TJ.
Interventional Cardiology Clinics. 2017, 6, 1-12
https://doi.org/10.1016/j.iccl.2016.08.001
Article|Google Scholar
The critical role of myosin IIA in platelet internal contraction.
Johnson GJ, Leis LA, Krumwiede MD, White JG.
Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2007, 5, 1516-1529
https://doi.org/10.1111/j.1538-7836.2007.02611.x
Article|Google Scholar
Calpain Cleavage of Focal Adhesion Proteins Regulates the Cytoskeletal Attachment of Integrin αIIbβ3 (Platelet Glycoprotein IIb/IIIa) and the Cellular Retraction of Fibrin Clots.
Schoenwaelder SM, Yuan Y, Cooray P, Salem HH, Jackson SP.
Journal of Biological Chemistry. 1997, 272, 1694-1702
https://doi.org/10.1074/jbc.272.3.1694
Article|Google Scholar
Biphasic myosin II light chain activation during clot retraction.
Egot M, Kauskot A, Lasne D, Gaussem P, Bachelot-Loza C.
Thrombosis and Haemostasis. 2013, 110, 1215-1222
https://doi.org/10.1160/TH13-04-0335
Article|Google Scholar
Quantitative Morphology of Cerebral Thrombi Related to Intravital Contraction and Clinical Features of Ischemic Stroke.
Khismatullin RR, Nagaswami C, Shakirova AZ, Vrtková A, Procházka V, Gumulec J, et al.
Stroke. 2020, 51, 3640-3650
https://doi.org/10.1161/STROKEAHA.120.031559
Article|Google Scholar
Asymmetrical Forces Dictate the Distribution and Morphology of Platelets in Blood Clots.
Kovalenko TA, Giraud M-N, Eckly A, Ribba A-S, Proamer F, Fraboulet S, et al.
Cells. 2021, 10, 584
https://doi.org/10.3390/cells10030584
Article|Google Scholar
Interspecies differences in protein expression do not impact the spatiotemporal regulation of glycoprotein VI mediated activation.
Dunster JL, Unsworth AJ, Bye AP, Haining EJ, Sowa MA, Di Y, et al.
Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2020, 18, 485-496
https://doi.org/10.1111/jth.14673
Article|Google Scholar
Control of Platelet CLEC-2-Mediated Activation by Receptor Clustering and Tyrosine Kinase Signaling.
Martyanov AA, Balabin FA, Dunster JL, Panteleev MA, Gibbins JM, Sveshnikova AN.
Biophysical Journal. 2020, 118, 2641-2655
https://doi.org/10.1016/j.bpj.2020.04.023
Article|Google Scholar
Hierarchical organization in the hemostatic response and its relationship to the platelet-signaling network.
Stalker TJ, Traxler EA, Wu J, Wannemacher KM, Cermignano SL, Voronov R, et al.
Blood. 2013, 121, 1875-1885
https://doi.org/10.1182/blood-2012-09-457739
Article|Google Scholar